Structure· 2026Q1
Kriyo-ET için Basitleştirilmiş Yüksek Basınçlı Dondurma İş Akışı
A simplified high-pressure freezing workflow in Autogrids
- 2atıf
- Q1SCImago
- 2026yıl
Kısa özet
Autogrid uyumlu yeni tasarlanmış planşetler kullanan basitleştirilmiş bir yüksek basınçlı dondurma (HPF) iş akışı, daha az elleçleme ve grid hasarı ile kalın numunelerin sağlam vitrifikasyonunu sağlar.
Yapay zekâ ile başlık ve abstract'tan üretildi; tam metin okunmaz.
Ana noktalar
- Yüksek basınçlı dondurma (HPF) için doğrudan kesilmiş EM Autogrid'lerini barındıran yeni planşetler tanıtılmaktadır.
- Kalınlık kontrolü için değiştirilebilir kapaklar ile kalın numunelerin (yaklaşık 200 µm'ye kadar) sağlam vitrifikasyonunu sağlar.
- Dondurma sonrası elleçlemeyi en aza indirir ve geleneksel HPF yöntemlerine kıyasla grid hasarı riskini azaltır.
- Cryo-ET ve subtomogram ortalaması için hücresel ultra yapının ve makromoleküler bütünlüğün güvenilir korunmasını gösterir.
- On-grid lamella hazırlığı ve kaldırma yaklaşımları için plazma iyon ışını öğütme ile entegre olur.
Yapay zekâ ile başlık ve abstract'tan üretildi; tam metin okunmaz.
Özet (abstract)
Abstract Cryo-electron tomography (cryo-ET) is a powerful method for studying biological structures in near-native states, yet vitrification of thick and complex specimens remains a major limitation. High-pressure freezing (HPF) allows vitrification of up to ∼200 µm thick samples, but its seamless integration into cryo-electron microscopy (cryo-EM) workflows is hindered by planchettes that are not optimized for EM grids, resulting in extensive handling, reliance on user experience, and frequent grid damage. Here, we present a streamlined HPF workflow based on newly designed planchettes that directly accommodate clipped EM Autogrids. Combined with interchangeable lids for controlling sample thickness, this system enables robust vitrification of diverse specimens, including single-celled eukaryotes and tissue biopsies, while minimizing post-freezing handling. Integration with plasma-focused ion beam milling supports both on-grid lamella preparation and lift-out approaches. We demonstrate reliable preservation of cellular ultrastructure and macromolecular integrity by cryo-ET and subtomogram averaging. This resource provides a practical and scalable solution for integrating HPF into modern cryo-ET pipelines, expanding access to structurally complex biological systems and supporting future clinical applications.
Yazarların özeti; kaynağından alınmıştır. Structure, 2026 · DOI ↗
Ücretsiz hesapla devam et
Makaleye Sor ile bu makaleye günde 3 soru ücretsiz; makaleyi kaydet, kaynakçasını al, ilgi alanına göre her gün yeni özetler. Çıkarımlar Premium.
Web'de ücretsiz devam etGoogle ya da Apple hesabınla giriş; kart istemez. Bu makaleye geri dönersin.
Telefonda:
Structural BiologyBiochemistry, Genetics and Molecular Biology