DSpace@MIT (Massachusetts Institute of Technology)· 2012
Canlı Hücrelerde Miyokondrilerin Proteomik Haritalanması: Mekansal Olarak Kısıtlanmış Enzimatik Etiketleme Yoluyla
Proteomic Mapping of Mitochondria in Living Cells via Spatially Restricted Enzymatic Tagging
- 1.390atıf
- 2012yıl
Kısa özet
Genetik olarak hedeflenebilen bir peroksidaz enzimi kullanarak canlı hücrelerdeki endojen proteinleri etiketleyen ve tanımlayan yeni bir yöntem, daha önce ilişkilendirilmeyen 31'i dahil olmak üzere insan mitokondriyal matriksinde 495 proteini başarıyla haritaladı.
Yapay zekâ ile başlık ve abstract'tan üretildi; tam metin okunmaz.
Ana noktalar
- Canlı hücrelerde proteomik haritalama için genetik olarak hedeflenebilen peroksidaz etiketlemesini kütle spektrometrisi ile birleştiren bir yöntem geliştirildi.
- İnsan mitokondriyal matriksinde, daha önce ilişkilendirilmeyen 31'i dahil olmak üzere 495 protein tanımlandı.
- Matriks tarafına bakan ve intermembran boşluğuna bakan iç zar proteinlerini ayırt eden yüksek özgüllük gösterildi.
- Proteomik verilere dayanarak protoporfirinogen oksidaz gibi birkaç proteinin mitokondriyal matriksine yeniden atandığı, elektron mikroskobu ile doğrulandı.
Yapay zekâ ile başlık ve abstract'tan üretildi; tam metin okunmaz.
Özet (abstract)
Microscopy and mass spectrometry (MS) are complementary techniques: The former provides spatiotemporal information in living cells, but only for a handful of recombinant proteins at a time, whereas the latter can detect thousands of endogenous proteins simultaneously, but only in lysed samples. Here, we introduce technology that combines these strengths by offering spatially and temporally resolved proteomic maps of endogenous proteins within living cells. Our method relies on a genetically targetable peroxidase enzyme that biotinylates nearby proteins, which are subsequently purified and identified by MS. We used this approach to identify 495 proteins within the human mitochondrial matrix, including 31 not previously linked to mitochondria. The labeling was exceptionally specific and distinguished between inner membrane proteins facing the matrix versus the intermembrane space (IMS). Several proteins previously thought to reside in the IMS or outer membrane, including protoporphyrinogen oxidase, were reassigned to the matrix by our proteomic data and confirmed by electron microscopy. The specificity of peroxidase-mediated proteomic mapping in live cells, combined with its ease of use, offers biologists a powerful tool for understanding the molecular composition of living cells.
Yazarların özeti; kaynağından alınmıştır. DSpace@MIT (Massachusetts Institute of Technology), 2012 · DOI ↗
Ücretsiz hesapla devam et
Makaleye Sor ile bu makaleye günde 3 soru ücretsiz; makaleyi kaydet, kaynakçasını al, ilgi alanına göre her gün yeni özetler. Çıkarımlar Premium.
Web'de ücretsiz devam etGoogle ya da Apple hesabınla giriş; kart istemez. Bu makaleye geri dönersin.
Telefonda:
Alan: Spektroskopi
SpectroscopyChemistry